JoVE 실험 백과사전
Microbiology
0 조회수 • 2:01 분 • August 29th, 2025
폴리비닐 포멀 레진 코팅 투과 전자 현미경 또는 TEM 그리드를 깨끗한 플라스틱 필름 위에 놓습니다.
농축되고 정제된 세포외 소포 또는 EV, 나노 크기의 막 결합 입자의 현탁액을 그리드에 추가합니다.
이 EV는 시아노박테리아에 의해 분비되며 막 내에 거대분자를 운반합니다.
EV가 수지 코팅 표면에 흡착될 수 있도록 그리드를 배양합니다.
깨끗한 여과지로 그리드 가장자리를 만져 과도한 현탁액을 흡수합니다.
유라닐 아세테이트 위에 그리드를 띄워 부착된 소포를 염색합니다.
우라닐 아세테이트가 소포를 둘러싸고 있어 이미징 중 대비를 향상시키는 어두운 윤곽을 만듭니다.
그리드를 제거하고 여과지를 사용하여 과도한 얼룩을 흡수합니다.
잔여 얼룩을 제거하기 위해 초순수로 그리드를 씻으십시오. 세탁을 반복한 다음 자연 건조시키십시오.
마지막으로 TEM을 사용하여 EV를 시각화하여 형태, 크기 및 순도를 평가합니다.
5마이크로리터의 소포를 조심스럽게 바르고 5분 동안 그대로 두십시오. 그리드의 가장자리를 깨끗한 여과지에 대고 샘플을 제거합니다.
플라스틱 필름으로 덮인 평평한 표면에 20-50마이크로리터의 2%우라닐 아세테이트를 피펫팅합니다. 그런 다음 그리드를 그 위에 2분 동안 떠 놓습니다. 여과지를 사용하여 우라닐 아세테이트를 제거하고 초순수 한 방울에 잠시 띄워 씻습니다.