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Immunology
0 조회수 • 2:25 분 • July 8th, 2025
미세아교세포 단층을 포함하는 멀티웰 챔버 슬라이드를 가져 가십시오.
테스트 웰에서 세포를 β-글루칸으로 코팅합니다. 컨트롤 웰에는 β-글루칸이 부족합니다. 인큐베이트.
테스트 우물에서 병원체 관련 분자 패턴인 β-글루칸은 미세아교세포의 특정 수용체에 결합하여 β-글루칸 식균 작용을 유발합니다.
이것은 미세아교세포를 활성화하여 반응성 산화제 및 사이토카인과 같은 생리 활성 분자를 생성하고 배지로 방출합니다.
우물에서 생리 활성 분자를 포함하는 배지를 수집하고 여과하여 파편과 β-글루칸을 제거합니다.
생리 활성 분자의 생물학적 활성을 보존하기 위해 배지를 저온에서 동결합니다.
다음으로, 배지를 해동하여 뇌암 세포의 단층이 포함된 멀티웰 챔버 슬라이드에 추가합니다. 인큐베이트.
생리 활성 분자는 세포 신호 전달 경로를 유발하여 암세포 증식을 감소시키고 세포사멸을 유도합니다.
암세포 증식 감소 및 세포사멸 증가는 뇌암 세포에 대한 미세아교세포의 항종양 특성을 촉진하는 제제로서 β글루칸을 시사합니다.
P. ostreatus, P. djamor, G. lucidum 및 H. erinaceus에서 분리된 4가지 다른 베타글루칸의 밀리리터당 0.2밀리그램 농도로 BV-2 미세아교세포를 72시간 동안 코팅하여 미세아교세포를 활성화합니다. 72시간 후 피펫으로 상청액을 수집하고 남은 부피를 0.20마이크로미터 주사기 필터에 통과시킵니다. 그런 다음 상청액을 섭씨 -80도에서 최소 24시간 동안 얼립니다. 사전 활성화된 미세아교세포 조절 배지로 GL261을 처리하려면 250마이크로리터의 베타-글루칸 처리된 미세아교세포 배지를 80% 합류 GL261 세포에 72시간 동안 첨가합니다.