Cold Atmospheric Plasma Treatment를 이용한 신경줄기세포 분화 자극

0 조회수2:20 • July 8th, 2025

적절한 분화 배지에서 세포외 기질로 코팅된 커버슬립에서 배양된 신경 줄기 세포로 시작합니다.

자외선과 하전 입자를 포함한 다양한 반응성 성분을 포함하는 물질 상태인 차가운 플라즈마가 들어 있는 주사기를 가져 가십시오.

혈장 주사기의 노즐을 신경 세포 배양 위의 특정 높이에 배치합니다.

플라즈마 제트를 시작합니다.

혈장은 신경 줄기 세포와 상호 작용하여 활성화합니다.

오래된 배양 배지를 제거합니다. 신선한 배양 배지를 추가하고 배양합니다.

시간이 지남에 따라 활성화된 신경 줄기 세포는 투영을 생성합니다.

매체를 버립니다.

역위상차 광학 현미경에서 신경 세포에서 발견되는 것과 유사한 길쭉한 돌출부가 세포에 존재하면 분화를 나타냅니다.

신경 줄기 세포를 플라즈마 처리하려면 주사기 노즐과 세포의 첫 번째 웰 사이의 거리를 15mm로 설정합니다. 신경줄기세포 배양물의 상청액을 800마이크로리터의 신선한 분화 배지로 교체하고 플레이트를 플라즈마 제트 아래에 놓습니다.

주사기 노즐이 각 웰의 중앙에 고정되어 있는지 확인하고, 처리당 60초 동안 플라즈마로 3개의 웰을 만들고, 처리당 60초 동안 1% 헬륨과 산소 가스로 3개의 웰을 만들고 3개의 웰을 대조군으로 처리하지 않은 상태로 둡니다. 그런 다음 상청액을 1밀리리터의 신선한 분화 배지로 교체하고 세포를 인큐베이터에 6일 동안 되돌립니다. 거꾸로 된 위상차 광학 현미경으로 매일 다른 그룹의 감별 상태를 확인하십시오.

처리 후, 상청액을 신선한 분화 배지로 교체하기 전에 약 1시간 동안 조절된 배지에서 세포가 완전히 평형을 이룰 때까지 기다립니다.