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Neuroscience
0 조회수 • 2:55 분 • July 8th, 2025
고자당 용액에 마우스 뇌 반구를 취하십시오. 접착제를 사용하여 진동 절개 표본 플레이트에 복부 면이 위를 향하도록 반구를 고정합니다.
시편 플레이트를 슬라이싱 챔버로 옮깁니다.
반냉동 고자당 용액을 첨가하여 조직의 생리적 상태를 유지하고 접착제를 응고시킵니다.
조직 산소 공급을 유지하기 위해 이산화탄소-산소 혼합물을 공급합니다.
set 매개 변수를 사용하여 초기 조각을 가져와 제거합니다. 또한, 수평 해마 절편을 얻습니다.
조직 회복을 위해 이러한 뇌 절편을 ACSF가 포함된 챔버로 조심스럽게 옮깁니다.
수평 해마 조각은 추가 실험을 위한 준비가 되었습니다.
뇌의 복부 부분이 위를 향하도록 갓 자른 등쪽에 양쪽 반구를 놓고 초강력 접착제 한 방울을 표본 플레이트에 놓습니다. 피펫 팁을 사용하여 접착제를 넓은 영역에 펴서 두 조직 조각을 모두 수용하고 여과지 스트랩을 한쪽 반구의 복부에 대십시오. 다른 여과지 스트랩을 사용하여 뇌의 등쪽을 조심스럽게 반건조시키고 반구 등쪽을 아래로 향하게 하여 표본 플레이트의 접착제 위에 놓습니다.
두 개의 추가 여과지 스트랩을 사용하여 방금 설명한 대로 두 번째 반구를 접착제 위에 배치하고 시편 플레이트를 슬라이싱 챔버에 놓습니다. 그런 다음 빠르고 조심스럽게 얼음처럼 차가운 고자당 슬라이스 용액 슬러시로 접시를 덮습니다. 뇌 조직의 절편을 얻으려면 진동 절개 블레이드를 반구의 내측 앞에 배치하고 블레이드가 이제 위를 향하는 반구의 복부 측면과 같은 높이에 있도록 진동 절개 테이블을 들어 올립니다.
진동 절개제 컨트롤을 사용하여 블레이드를 등쪽 방향으로 600미크론 더 낮추고 처음 두 슬라이스가 두 반구에서 완전히 분리될 때까지 조직을 슬라이스합니다. 처음 두 개의 조직 조각이 얻어지면 절단 방향을 반대로 하고 블레이드를 300미크론 더 낮추고 다시 슬라이스합니다. 해마가 보이면 넓어진 플라스틱 파스퇴르 피펫을 사용하여 슬라이스를 수집하여 수조의 회수 챔버로 옮깁니다.