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Neuroscience
0 조회수 • 3:06 분 • July 8th, 2025
흰 눈의 초파리 파리를 녹음 경기장의 홀더에게 확보하십시오.
플라이 근처에 광원을 배치합니다.
접지 전극을 파리의 등에 이식합니다.
광색소를 포함하는 망막 광수용체 세포 근처의 파리 눈의 바깥쪽 주변에 기록 전극을 삽입합니다.
파리를 잠깐 어둡게 적응시키십시오. 이것은 광색소의 빛 활성화 형태인 메타로돕신을 비활성 형태인 로돕신으로 전환합니다.
고강도 주황색 광 펄스를 적용합니다. 이것은 남아 있는 메타로돕신을 로돕신으로 전환합니다.
다음으로 블루라이트 펄스를 적용합니다. 청색광은 로돕신을 메타로돕신으로 전환하여 신호 캐스케이드를 시작하고 특정 이온 채널을 엽니다.
이는 청색광이 제거된 후에도 지속적인 양이온 유입과 지속적인 탈분극을 유도합니다.
이제 주황색 광 펄스를 다시 적용하여 메타로돕신을 로돕신으로 변환합니다.
이것은 신호 캐스케이드를 중지하고 PDA를 종료하며 광수용체 막을 재분극시킵니다.
플라이 홀더를 자석 블록의 어두운 패러데이 케이지에 놓고 플라이가 라이트 가이드 끝에서 약 5mm 떨어져 있는지 확인합니다. 마이크로 매니퓰레이터를 사용하여 파리의 눈 위에 기록 전극을 놓고 접지 전극을 파리의 등 위쪽 위에 놓습니다. 그런 다음 마이크로 매니퓰레이터를 사용하여 접지 전극을 플라이 뒤쪽에 삽입합니다.
기록 전극을 파리 눈의 바깥쪽 주변에 삽입하고, 가급적이면 마이크로 매니퓰레이터를 사용합니다. 패러데이 케이지를 닫고 방의 조명을 꺼서 5분 동안 어둠에 적응할 수 있도록 합니다. 초당 500미터의 펄스 지속 시간, 60초의 펄스 간격, 6개로 설정된 펄스 수부터 시작하여 매개변수를 입력합니다.
PDA를 측정하려면 마스터 속도 펄스 발생기를 트레인 모드로 설정합니다. 그런 다음 주황색 필터를 사용하여 최대 강도의 5초 광 펄스를 제공합니다. 전압 응답을 확인하십시오. 주황색 필터를 광대역 파란색 필터로 교체하고 최대 강도로 5초 광 펄스 3개를 제공합니다. 전압 응답을 확인하십시오.
어둠 속에서 최소 60초 동안 기다리십시오. 파란색 필터를 이전 주황색 필터로 교체합니다. 그런 다음 60초 간격으로 5초짜리 빛 펄스를 두 번 줍니다. 전압 응답을 확인하십시오.