Name: Productie en gebruik van aanpasbare agarose-mallen voor steigervrije ovariële follikelcultuur van muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-24T13:10:00.000+00:00
Duration: 9 min 50 s
Description: Leer een aanpasbare, steigervrije agarose-methode voor ovariële follikelcultuur bij muizen. Deze techniek verbetert follikelgroei, ovulatie en oöcyt-kwaliteit in reproductief onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<table><tbody><tr><td>Materialen en chemicaliën</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>&nbsp;50 mL Polystyreen Centrifugebuizen</td><td>Globe Scientific</td><td>941-11017-CS</td><td></td></tr><tr><td>1.5 mL Microcentrifugebuizen</td><td>Fisher Scientific</td><td>MCT-150</td><td>Om media snel in te vriezen en op te slaan</td></tr><tr><td>100 mm Schaal, niet-behandeld</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-757-100D&nbsp;</td><td>Om agarose microvormpjes te maken en te bewaren</td></tr><tr><td>100% Ethanol</td><td>Mercedes Scientific</td><td>1200</td><td>Weefselverwerking</td></tr><tr><td>1000 &micro;L&nbsp; Pipettips, lagere retentie</td><td>MIDSCI</td><td>PR-1000BK</td><td>Cultuurtips&nbsp;</td></tr><tr><td>200 &micro;L&nbsp; Pipettips, lagere retentie</td><td>MIDSCI</td><td>PR-200BK</td><td>Cultuurtips&nbsp;</td></tr><tr><td>24-well plaat</td><td>Corning</td><td>353047</td><td>Cultuur</td></tr><tr><td>35 mm schalen</td><td>Falcon</td><td>351008</td><td>Om eierstokken te isoleren en in enzymatische media te incuberen</td></tr><tr><td>95% Ethanol</td><td>Mercedes Scientific</td><td>1210</td><td>Weefselverwerking</td></tr><tr><td>Agarose</td><td>Hoefer</td><td>GR140</td><td>Microvormpjes</td></tr><tr><td>BioXtra Minerale Olie, Lichte Olie, Geschikt voor muis embryo celcultuur</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M5310-500ML</td><td>Gebruikt als biocompatibel ontvormingsmiddel</td></tr><tr><td>Bovine Serum Albumine&nbsp;</td><td>MP Biomedicals</td><td>103700</td><td>Groeimedia</td></tr><tr><td>Reinigingsstofdoeken, 10 Oz., Verpakking van 6</td><td>Office Depot&nbsp;</td><td>110284</td><td>Gecomprimeerde lucht</td></tr><tr><td>Clear V4 Resin 1 L</td><td>Formlabs, Inc</td><td>RS-F2-GPCL-04</td><td>3D printhars</td></tr><tr><td>Corning Herbruikbare Plastic Lage Vorm 100 mL Beker, Polypropyleen, Gegradueerd</td><td>Corning</td><td>1000P-100</td><td>Beker voor het mengen van siliconencomponenten&nbsp;</td></tr><tr><td>DNAse I</td><td>Qiagen</td><td>79254</td><td>Enzymatische Media</td></tr><tr><td>Ecoflex 00-45 Bijna Helder</td><td>Smooth-On, Inc</td><td>B09M8Y9PTV</td><td>Silicone materiaal</td></tr><tr><td>F-12 + GlutaMAX</td><td>Gibco</td><td>31765-035</td><td>Groeimedia</td></tr><tr><td>Foetaal Rundse Fetuïne</td><td>Sigma</td><td>F-3385</td><td>Groeimedia</td></tr><tr><td>Foetaal Rundse Serum (FBS)</td><td>Peak Serum</td><td>PS-FB2</td><td>Dissectie Media, Enzymatische Media,&nbsp; Onderhoud Media &amp; Rijpings Media</td></tr><tr><td>Fisherbrand&nbsp;Sterilisatie Zakjes</td><td>Fisher Scientific</td><td>01-812-50&nbsp;</td><td>Sterilisatie Zakjes</td></tr><tr><td>Follikelstimulerend hormoon (FSH)</td><td>EMD Serono, Inc.</td><td>Gonal-F Rx only&nbsp;</td><td>Groeimedia &amp; Rijpings Media</td></tr><tr><td>Gibco&nbsp;DPBS, calcium, magnesium</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-040-182&nbsp;</td><td>Dulbecco's fosfaat-gebufferde zoutoplossing</td></tr><tr><td>Humaan choriongonadotrofine (hCG)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C1063-1VL</td><td>Rijpings Media</td></tr><tr><td>Insulin-transferrine-selenium (ITS)</td><td>ThermoFisher</td><td>41400045</td><td>Groeimedia</td></tr><tr><td>Invitrogen Molecular Probes Rodhamine Phalloidin</td><td>Fisher Scientific</td><td>R415</td><td>Ei Cytoskelet Kleuring</td></tr><tr><td>IVF Schalen</td><td>Thermo Scientific</td><td>150260</td><td>Om eierstokken te isoleren, te selecteren en voor te gelijkmaken</td></tr><tr><td>Leibovit'z 15 (L15)</td><td>Gibco</td><td>11415-064</td><td>Dissectie Media &amp; Enzymatische Media</td></tr><tr><td>Liberase</td><td>Sigma Aldrich</td><td>5401119001</td><td>Enzymatische Media</td></tr><tr><td>MEM? + GlutaMAX</td><td>Gibco</td><td>32561-037</td><td>Onderhoud Media,&nbsp; Groeimedia &amp; Rijpings Media</td></tr><tr><td>Muis Epidermale Groeifactor (EGF)</td><td>BD Biosciences</td><td>354010</td><td>Rijpings Media</td></tr><tr><td>Nalgene Transparante Polycarbonaat Klassiek Design Droogkast</td><td>Thermo Scientific</td><td>5311-0250</td><td>Vacuüm Droogkast&nbsp;</td></tr><tr><td>Paraffine</td><td>Fisher Scientific</td><td>83-30</td><td>Weefselverwerking &amp; Insluiting</td></tr><tr><td>Penicilline-streptomycine</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td>Dissectie Media, Enzymatische Media &amp; Onderhoud Media</td></tr><tr><td>Stripper tips</td><td>Origio</td><td>MXL3-200</td><td>Cultuur</td></tr><tr><td>VECTASHIELD PLUS Antifade Montage Medium met DAPI</td><td>Vector Laboratories</td><td>H-2000</td><td>Ei kernkleuring</td></tr><tr><td>Xyleen</td><td>Mercedes Scientific</td><td>9840</td><td>Weefselverwerking</td></tr><tr><td>&alpha;-Tubulin (11H10) Konijn mAb (Alexa Fluor 488 Conjugaat)</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>5063S</td><td>Ei Tubulin Kleuring</td></tr><tr><td>Apparatuur</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bouwplatform 2</td><td>Formlabs, Inc</td><td>BP-F3-02-01&nbsp;</td><td>3D printer component</td></tr><tr><td>Dino-Lite Edge AF4915ZTL, USB 2.0</td><td>Dino-Lite</td><td>AF4915ZTL</td><td>Imager voor timelapse setup</td></tr><tr><td>Form 3 Resin Tank V2.1&nbsp;</td><td>Formlabs, Inc</td><td>RT-F3-02-01</td><td>3D printer component</td></tr><tr><td>Form 3B+ 3D Printer</td><td>Formlabs, Inc</td><td>F3B-P-PRINTER</td><td>Formlabs' stereolithografie (SLA) 3D printer</td></tr><tr><td>Form cure&nbsp;</td><td>Formlabs, Inc</td><td>FH-CU-01</td><td>Uithardingsplatform&nbsp;</td></tr><tr><td>Form wash</td><td>Formlabs, Inc</td><td>FH-WA-01</td><td>Wasplatform</td></tr><tr><td>Spuitfles met pompverdamper</td><td>VWR</td><td>0309-3005</td><td>Om ontvormingsmiddel aan te brengen</td></tr><tr><td>Licht focus/concentrator dop voor Edge serie (exclusief T5, T8 modellen)</td><td>Dino-Lite</td><td>N3C-R</td><td>Imager component voor timelapse setup</td></tr><tr><td>Montagehouderbundel die de RK-10 rek en RK-10-EX Arm Verlenging combineert</td><td>Dino-Lite</td><td>RK-10A</td><td>Imager component voor timelapse setup</td></tr><tr><td>Weefsel Inbeddingsapparaat</td><td>Leica</td><td>HistoCore Arcadia</td><td>Om microvormpjes in te bedden</td></tr><tr><td>Weefsel Verwerker</td><td>Leica</td><td>TP1020</td><td>Om microvormpjes te verwerken</td></tr><tr><td>211DS Schudende Incubator (Orbitale Shaker)</td><td>Labnet International</td>

productie en gebruik van aanpasbare agarose-mallen voor steigervrije ovariële follikelcultuur van muizen

Production and Use of Customizable Agarose Molds for Scaffold-Free Mouse Ovarian Follicle Culture

Productie en gebruik van aanpasbare agarose-mallen voor steigervrije ovariële follikelcultuur van muizen

The ovarian follicle is the functional unit of the ovary that produces hormones and gametes needed to sustain female reproductive function and health. The ...

production-use-customizable-agarose-molds-for-scaffold-free-mouse

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Een nieuwe methode voor ovariële follikel inkapseling in een 3D-fibrine-alginaat interpenetrerend netwerk wordt beschreven. Dit systeem combineert een structurele ondersteuning met proteolytische degradatie van de ontwikkeling van onvolgroeide follikels steun aan rijpe eicellen te produceren. Deze methode kan worden toegepast op de cultuur cel aggregaten tot cel-cel contacten, zonder beperking van de uitbreiding te behouden.

Een methode voor ovariële follikel Encapsulation en cultuur in een proteolytisch Afbreekbare 3 dimensionale systeem

Cultuur van normale cellen in hun drie-dimensionale context is een alternatieve methode voor vroege gebeurtenissen die nodig is voor cellulaire transformatie en tumorvorming te bestuderen. Deze methode wordt gebruikt om de normale eierstokken en oviductal cellen groeien naar vroege gebeurtenissen bij eierstokkanker vorming te bestuderen.

Alginaat Hydrogelen voor Three-Dimensional orgelcultuur van de eierstokken en eileiders

Dit protocol beschrijft de primaire cultuur / co-cultuur van de muis eierstokweefsel, met behulp van de eierstokken van pasgeboren muizen en individuele ovariële follikels van prepuberale muizen. De kweektechnieken ondersteunen In een sterk fysiologische wijze, waardoor onderzoek naar het effect van extrinsieke middelen op de eierstok en interacties tussen ovariële follikels.

Cultuur en co-cultuur van de Muis eierstokken en ovariële follikels

Dit protocol beschrijft een platform voor het fabriceren van zelf geassembleerde weefsel ringen in verschillende afmetingen met behulp van een aangepaste 3D-gedrukte kunststof schimmel. PDMS negatieven worden genezen in de 3D-gedrukte mal; vervolgens is agarose gegoten in de uitgeharde PDMS negatieven. Cellen worden overgeënt in de resulterende agarose putten waar ze in weefsel ringen aggregaat.

Fabricage van aangepaste Agarose putten voor het zaaien van de cellen en weefsel Ring zelf-assemblage met behulp van 3D-gedrukte mallen

Hier worden twee protocollen gepresenteerd voor de inkapseling van varkensocyten in 3D-kweekomstandigheden. In de eerste worden cumulus-eicellencomplexen (COC's) ingekapseld in fibrin-alginaatkralen. In de tweede zijn ze ingesloten met gefluoreerde ethyleenpropyleenpoederdeeltjes (microbioreactoren). Beide systemen zorgen voor optimale omstandigheden om hun 3D-organisatie te onderhouden.

Proteolytisch afgebroken alginaat hydrogels en hydrofobe microbioreactoren voor porcine Oocyte Inkapseling

Hier worden vier methoden beschreven voor het genereren van testiculaire organoïden uit primaire neonatale murine-testiculaire cellen, d.w.z. extracellulaire matrix (ECM) en ECM-vrije 2D- en 3D-cultuuromgevingen. Deze technieken hebben meerdere onderzoekstoepassingen en zijn vooral nuttig voor het bestuderen van testiculaire ontwikkeling en fysiologie in vitro.

Extra Cellular Matrix-based en extra cellular matrix-vrije generatie van Murine Testiculaire Organoïden

Het huidige protocol beschrijft een techniek om op grote schaal en kosteneffectief weefselsferoïden te produceren met behulp van een 3D-geprint stempelachtig apparaat.

Genereren van weefselsferoïden via een 3D-geprint stempelachtig apparaat

Dit protocol beschrijft een nieuw driedimensionaal (3D) kweekmodel waarbij gebruik wordt gemaakt van een tyramine-gekoppelde hyaluronzuurhydrogel om preantrale follikels uit de eierstok van de muis in te kapselen en te kweken. We beschrijven ook twee benaderingen van cryopreservatie van de ovariële follikel door vitrificatie.

Toepassing van een nieuwe hyaluronzuurhydrogel voor driedimensionale follikelcultuur en methodologie voor cryopreservatie van de ovariële follikel bij muizen

Deze studie presenteert een kosteneffectieve en efficiënte methodologie voor het genereren van 3D-celstructuren met behulp van een op stempels gebaseerd systeem om microwells in agaroseschimmels te maken. Het systeem bevordert de vorming van uniforme sferoïden/organoïden, waardoor de celinteracties worden verbeterd. Deze aanpak vermindert de experimentele variabiliteit en ondersteunt toepassingen in het testen van geneesmiddelen en weefselmanipulatie.

Generatie van driedimensionale sferoïden/organoïden uit tweedimensionale celculturen met behulp van een nieuw stempelapparaat

We beschrijven methoden om somatische cellen van muis-ovariumcellen te isoleren uit een stroma-verrijkte fractie van de eierstok en om somatische organoïden van muis-ovarium te genereren met een steigervrije benadering.

Onderzoek naar de ovariummicroomgeving: Methoden voor isolatie, 2D-kweek en organoïde kweek van somatische cellen van muis eierstokcellen

Leer een aanpasbare, steigervrije agarose-methode voor ovariële follikelcultuur bij muizen. Deze techniek verbetert follikelgroei, ovulatie en oöcyt-kwaliteit in reproductief onderzoek.

Productie en gebruik van aanpasbare agarose-mallen voor steigervrije ovariële follikelcultuur van muizen

Meer video's verkennen