Stereotaktyczne wstrzykiwanie hydrożelu do mysiego modelu po udarze

Przymocuj znieczuloną mysz po udarze na ramie stereotaktycznej.

Ponownie otwórz nacięcie skóry głowy i oczyść odsłoniętą czaszkę bawełną nasączoną solą fizjologiczną.

Zidentyfikuj biało-żółty martwiczy rdzeń w tkance mózgowej i otwór w zadziorze, który potwierdza miejsce udaru.

Ten martwiczy rdzeń zawiera uszkodzone neurony i niefunkcjonalne naczynia krwionośne.

Podłączyć do pompy strzykawkę z mikroporowatymi hydrożelowymi cząstkami i ustawić współrzędne wstrzyknięcia.

Opuścić strzykawkę powyżej otworu zadziorów, a następnie włożyć ją w miejsce pociągnięcia.

Wstrzyknąć hydrożel z kontrolowanym natężeniem przepływu, aby zapewnić stopniową dyfuzję bez uszkodzenia tkanki mózgowej.

Inkubować, aby hydrożel mógł się usieciować, tworząc rusztowanie z biomateriału.

Powoli wycofać strzykawkę, upewniając się, że hydrożel utrzymuje się bez wycieków.

Zamknij nacięcie klejem chirurgicznym i włóż mysz z powrotem do klatki.

Rusztowanie hydrożelowe naśladuje macierz zewnątrzkomórkową, indukując infiltrację komórkową i tworzenie nowych naczyń krwionośnych, co wskazuje na potencjał hydrożelu w neuroterapeutyce.

Ponownie otwórz nacięcie nad mózgiem i użyj bawełny nasączonej solą fizjologiczną, aby usunąć wszelkie zanieczyszczenia z czaszki.

Widoczne będzie białe, żółte kółko tkanki i otwór na zadziory po wiertle. Zablokuj pompę wtryskową pod kątem 90 stopni nad myszką.

Załadować strzykawkę do pompy i przesunąć pompę oraz kierunki X i Y, aby ustawić strzykawkę nad otworem z zadziorami. Przesuń pompę w kierunku Z, aż igła dotknie górnej części otworu.

I zresetuj Z na konsoli wyświetlacza cyfrowego. Przesuń strzykawkę o 0,75 milimetra w kierunku Z i naciśnij start na konsoli pompy, aby wstrzyknąć od czterech do sześciu mikrolitrów hydrożelu przy natężeniu przepływu jednego mikrolitra na minutę. Kiedy cały hydrożel zostanie dostarczony, ustaw pięciominutowy timer, aby żel mógł rozpocząć sieciowanie.

Po pięciu minutach obrócić pokrętło Z, aby powoli podciągnąć strzykawkę. Gdy igła znajdzie się wystarczająco daleko od czaszki, odblokuj i wyjmij pompę. Następnie zamknij skórę nad czaszką i umieść mysz w czystej klatce z monitorowaniem, aż dojdzie do siebie po znieczuleniu.