JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Microbiology
0 wyświetleń • 2:09 min. • September 26th, 2025
Rozpocznij od płytki hodowlanej zawierającej próbkę szczepu bakteryjnego.
Używając wysterylizowanej igły do zaszczepiania, wybierz odizolowaną kolonię.
W sterylnych warunkach należy nakłuć tę kolonię do półstałego podłoża uzupełnionego bezbarwnym barwnikiem redoks. Półstałe podłoże ogranicza bierną dyfuzję bakterii.
Przygotować probówki kontrolne, kontrolę ujemną z nieruchliwym szczepem bakteryjnym pozbawionym wici i kontrolę pozytywną z wysoce ruchliwym, wiciowym szczepem bakteryjnym.
Inkubuj wszystkie zaszczepione probówki, aby wspomóc wzrost i ruchliwość bakterii.
Podczas inkubacji metabolicznie aktywne bakterie redukują bezbarwny barwnik redoks do nierozpuszczalnego produktu o czerwonym zabarwieniu.
Ruchliwe bakterie namnażają się i migrują przez półstałe podłoże za pomocą wici, tworząc rozproszoną czerwoną strefę promieniującą na zewnątrz do otaczającego podłoża.
Nieruchome bakterie namnażają się, ale nie migrują; Czerwona strefa pozostaje ograniczona do miejsca nakłucia.
Umożliwia to wizualne rozróżnienie nieruchliwych i ruchliwych szczepów bakteryjnych.
Pobrać pojedyncze kolonie bakterii z płytek agarowych i zaszczepić je w obu półstałych pożywkach przez nakłucie za pomocą igieł do zaszczepiania. Należy pamiętać, aby włączyć szczepy niemodalne jako kontrole ujemne, a szczepy modalne jako kontrole pozytywne.
Inkubować probówki w temperaturze 37 stopni Celsjusza i obserwować wyniki po 24 do 48 godzinach inkubacji. Jeśli tylko linia nakłucia jest czerwona, scharakteryzuj bakterie jako niemodalne.
Jeśli czerwony kolor rozprzestrzenia się na zewnątrz wzdłuż linii nakłucia, scharakteryzuj bakterie jako modalne.