JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Microbiology
0 wyświetleń • 2:22 min. • October 30th, 2025
Zacznij od znieczulonej myszy w pozycji leżącej, z ogoloną szyją.
Zdezynfekuj ogolony obszar.
Wykonaj nacięcie na szyi, a następnie wypreparuj mięsień, aby odsłonić tchawicę, drogę oddechową prowadzącą do dolnych dróg oddechowych, w tym płuc.
Weź strzykawkę wstępnie załadowaną bakteriami chorobotwórczymi dla płuc, umieszczoną między dwiema małymi objętościami powietrza.
Włóż igłę do tchawicy i wstrzyknij pierwszą objętość powietrza, aby oczyścić tchawicę.
Następnie należy dostarczyć inokulum bakteryjne, a następnie drugą objętość powietrza, aby zwiększyć dyspersję bakterii w głąb dolnych dróg oddechowych.
Krótko trzymaj mysz pionowo, aby zapewnić równomierne rozprowadzenie bakterii w dolnych drogach oddechowych.
Uszczelnij nacięcie klejem tkankowym i pozwól myszy dojść do siebie.
Metoda ta umożliwia bezpośrednie dostarczenie patogenów do dolnych dróg oddechowych, z pominięciem barier górnych dróg oddechowych.
Zacznij od znieczulenia myszy i sprawdzenia, czy jest odpowiednio znieczulona za pomocą szczypania palca u nogi.
Następnie ułóż mysz na plecach i ogol brzuszną część szyi. Zdezynfekuj odsłoniętą skórę. Teraz podnieś skórę górnej brzusznej części szyi za pomocą kleszczy do zębów szczura i za pomocą skalpela wykonaj nacięcie od pół do jednego centymetra nad grasicą.
Następnie ostrożnie oddziel mięsień, aby odsłonić tchawicę. Do tchawicy powoli wstrzyknij 50 mikrolitrów powietrza, następnie 50 mikrolitrów przygotowanego NTHi, a następnie kolejne 50 mikrolitrów powietrza.
Po wstrzyknięciu należy trzymać zwierzę w pozycji pionowej przez około minutę. Następnie zamknij nacięcie klejem tkankowym i trzymaj mysz bocznie leżącą i ciepłą przez około 10 minut.