Obrazowanie lokalizacji bakteryjnej i interakcji gospodarza w ludzkiej tkance płucnej

Weź fluorescencyjnie oznakowaną zawiesinę Staphylococcus aureus oraz ludzką tkankę płucną pęcherzyka zakażoną tymi samymi fluorescencyjnymi bakteriami.

Włóż dalszy czubek fibrograficznej sondy fluorescencyjnej konfokalnej do zawiesiny bakteryjnej i skanu.

Jasne sygnały fluorescencyjne potwierdzają znakowanie błon bakteryjnych i skuteczną aktywację sondy

Rejestruj fluorescencję podczas przesuwania sondy przez zawieszenie.

Używając tkanki przezroczystej w soczewkach nasączonej nadtlenkiem wodoru, wytrzyj sondę, aby usunąć resztki bakterii i zapobiec fluorescencji tła

Przyłóż czystą sondę do bezpośredniego kontaktu z tkanką i zeskanuj powierzchnię.

W tkance włókna kolagenu i elastyny pojawiają się jako matryca autofluorescencja, natomiast bakterie oznaczone fluorescencyjnym są widoczne jako wyraźne jasne plamy.

Przestrzenie pęcherzykowe, pozbawione fluorescencji, wyglądają jako ciemne obszary.

Nagraj wideo, aby uchwycić zarówno bakterie przylegające do tkanek, jak i luźno powiązane, umożliwiając wizualizację w czasie rzeczywistym zakażenia bakteryjnego w tkance płuc pęcherzyka gospodarza.

Aby rozpocząć zbieranie danych, kliknij Start na ekranie lub naciśnij lewy pedał nożny, aby włączyć laser. Następnie zrób zdjęcia każdej z próbek zawiesiny bakteryjnej. Włóż dalszy koniec światłowodu obrazującego FCFM i powoli przesuwaj włókno przez zawieszenie, aby zbadać próbkę.

Nagrywaj filmy dowolnej długości, naciskając prawy pedał nożny lub wybierając przyciski nagrywania na ekranie, gdy światłowód porusza się powoli wokół próbki. Oczyść dalszy koniec światła obrazowania FCFM 8% nadtlenkiem wodoru i czyścić tkanki soczewek między próbkami. Aby obrazować każdą z próbek tkanki płucnej, należy włożyć dalszy koniec włókna obrazującego FCFM do próbki, zapewniając bezpośredni kontakt między końcem włókna a tkanką.

Następnie delikatnie przesuwam koniec włókna obrazującego, aby zbadać próbkę. Podniesienie końca włókna od tkanki usuwa tkankę z płaszczyzny ogniskowej. Jednak może to być używane do obrazowania oznakowanych bakterii, które nie są przyczepione do tkanki.

Nagrywaj filmy dowolnej długości, naciskając prawy pedał nożny lub wybierając przyciski nagrywania na ekranie, gdy światłowód porusza się powoli wokół próbki.