JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Microbiology
0 wyświetleń • 1:28 min. • January 30th, 2026
Zacznij od skażonej próbki wody, która prawdopodobnie zawiera kałowe coliformy, w tym E. coli.
Wykonaj seryjne rozcieńczanie w wodzie destylowanej, aby zmniejszyć mętność i obciążenie mikroorganizmami.
Wymieszaj pożądaną próbkę z nośnikiem odżywczym i załaduj ją do mikrofluidu.
Użyj filtracji próżniowej, aby wychwytywać bakterie na membranie w serpentynowym kanale chipa.
Dodaj pożywkę do górnej komory i inkubuj, aby wspomóc regenerację bakterii.
Zastąpić podłoże roztworem fagów specyficznych dla E. coli przenoszących gen lucyferazy.
Inkubować, aby umożliwić infekcję fagami, gdzie DNA fagów replikuje się, degraduje DNA gospodarza i tworzy nowe fagi, produkując jednocześnie lucyferazę. Następnie zainfekowane komórki lizują, uwalniając lucyferazę.
Zastosowanie filtracji próżniowej, aby przenieść lucyferazę do błony wychwytującej.
Dodaj podłoże reagujące z lucyferazą, aby wygenerować luminescencyjny sygnał.
Za pomocą fotopowielacza zmierz luminescencję, która jest proporcjonalna do liczby żywotnych komórek E. coli w próbce wody.