JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Immunology
0 wyświetleń • 2:19 min. • July 8th, 2025
Zacznij od znieczulonej myszy pod mikroskopem stereoskopowym, z dolną stroną jednego z uszu myszy przymocowaną do stolika za pomocą taśmy klejącej.
Oczy pokryte są maścią, aby zapobiec ich wysuszeniu.
Przynieś strzykawkę wypełnioną sporozoitowym stadium Plasmodium, pasożyta malarii. Żywe sporozoity są tłumione promieniowanie, dzięki czemu nie są zakaźne.
Za pomocą mikroskopu stereoskopowego wstrzyknąć w górną część ucha, penetrując najbardziej zewnętrzną warstwę naskórka i uwalniając sporozoity do skóry właściwej.
Trzymać igłę na miejscu przez krótki czas, aby zapobiec cofaniu się wstrzykniętej zawiesiny przed jej usunięciem.
Widoczny obrzęk w miejscu wstrzyknięcia, zwany grudką, potwierdza udane wstrzyknięcie.
Wykonać kilka wstrzyknięć do tego samego ucha.
Zwolnić ucho, w które wykonano wstrzyknięcie, i powtórzyć wstrzyknięcia do drugiego ucha.
Po wstrzyknięciu pozwól myszy dojść do siebie.
Wstrzyknięte sporozoity wywołują odpowiedź immunologiczną, przygotowując układ odpornościowy do walki z pasożytem.
Przed wstrzyknięciem sporozoitów należy potwierdzić prawidłowy poziom uspokojenia zwierzęcia doświadczalnego poprzez uszczypnięcie palca u nogi i nałożenie maści do oczu, aby zapobiec wysuszeniu rogówki. Następnie, pracując szybko, za pomocą przezroczystej taśmy delikatnie zamocuj brzuszną stronę małżowiny usznej pod mikroskopem stereoskopowym i załaduj strzykawkę o pojemności 10 mikrolitrów wyposażoną w igłę o rozmiarze 35 z 0,6 mikrolitra zawieszonych pasożytów.
Następnie ostrożnie wbij igłę skośną stroną do góry, pod naskórek po grzbietowej stronie ucha i wstrzyknij w to miejsce 0,15 mikrolitra sporozoitów. W miejscu wstrzyknięcia będzie obserwowana charakterystyczna grudka. Po wstrzyknięciu skóry właściwej jeszcze trzy razy, jak właśnie pokazano, ostrożnie usuń taśmę i monitoruj mysz, aż w pełni wyzdrowieje.