Construção de uma Interface Nervosa Periférica Regenerativa Composta em um Modelo de Lesão Nervosa em Rato

Pegue um rato anestesiado com o nervo fibular comum da coxa seccionado para modelar a lesão do nervo periférico durante a amputação do membro.

Coloque um enxerto muscular de um rato doador sobre o músculo exposto da coxa. O centro do enxerto não possui a cobertura muscular mais externa, expondo as fibras musculares para a fixação do nervo.

Prenda a extremidade nervosa seccionada às fibras expostas e ancore o enxerto ao músculo subjacente.

Suture o nervo ao enxerto muscular para minimizar a tensão mecânica.

Posicione o enxerto de pele do rato doador, que consiste na camada dérmica, sobre o nervo.

Suturar o enxerto de pele ao enxerto muscular.

Esta interface nervosa periférica regenerativa composta, ou C-RPNI, suporta a regeneração nervosa.

Feche a ferida, desinfete o local, aplique antibióticos para prevenir infecções e permita a recuperação.

Com o tempo, os neurônios motores reinervam o músculo para formar junções neuromusculares, enquanto os neurônios sensoriais se estendem para o enxerto de pele para restabelecer as estruturas sensoriais.

Para fabricar a construção C-RPNI, coloque o enxerto muscular sob o microscópio de dissecação e remova todo o tecido tendíneo central, bem como um pequeno segmento central do epimísio, deixando as extremidades tendíneas intactas. Usando um 8-0 sutura de náilon e dois pontos interrompidos, prendem o epineuro da extremidade seccionada do nervo fibular comum à área do enxerto muscular desprovida de epimísio em ambos os lados do nervo.

Prenda o enxerto muscular ao periósteo do fêmur com um único ponto interrompido de náilon 6-0 proximal e distalmente com a junção do músculo nervoso voltada para longe do fêmur. Coloque um 8-0 Ponto de náilon na margem central inferior do epimísio do enxerto muscular, prendendo-o ao epineuro do nervo fibular comum, de modo a criar frouxidão no nervo dentro do enxerto muscular. Posicione o enxerto de pele no enxerto muscular de forma que cubra completamente o nervo e a maior parte do músculo com a margem profunda da derme apoiada no músculo.

Apare qualquer derme que se estenda além da borda do músculo e use 8-0 suturas interrompidas de nylon para prender circunferencialmente o enxerto de pele ao enxerto muscular. Feche a fáscia do bíceps femoral sobre a construção em execução com sutura crômica 5-0 e feche a pele sobrejacente com sutura crômica 4-0 em execução. Em seguida, troque a área cirúrgica por uma compressa com álcool e aplique pomada antibiótica antes de permitir que o rato se recupere com fontes de comida e água separadas dos companheiros de gaiola com monitoramento até a decúbito total.