Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Microbiology
0 visualizações • 2:08 min. • November 28th, 2025
Comece com um estoque congelado de bactérias.
Use um laço de inoculação estéril para estirar as bactérias congeladas em uma placa de ágar nutritivo. Incube a placa invertida para evitar a condensação de água na superfície do ágar.
As bactérias utilizam os nutrientes, crescem na superfície do ágar e formam colônias visíveis distintas.
Selecione uma única colônia e inocule-a em um meio líquido contendo nutrientes para iniciar uma cultura pura.
Incube o tubo sob condições vigorosas de tremor.
O agitar mantém a aeração no tubo e mantém as células suspensas, impedindo que se depositem no fundo.
Também garante uma distribuição uniforme dos nutrientes por todo o meio, promovendo o crescimento exponencial das bactérias.
Isso resulta em uma suspensão bacteriana densa e metabolicamente ativa.
A cultura bacteriana no meio líquido agora está pronta para novos experimentos.
Para usar o caldo, com um laço inoculador estéril, remova uma pequena quantidade de caldo congelado e faça estrias nas bactérias para obter colônias individuais em placas de ágar LB.
Incube as placas com a tampa para baixo por 12 a 16 horas a 37 graus Celsius. Obtenha um prato previamente preparado. Inocule 4 mililitros de caldo LB líquido em um tubo de cultura estéril de 10 mililitros com uma única colônia, tocando a superfície da colônia única com um laço esterilizado e transferindo a colônia para o caldo líquido. Em seguida, incube a cultura com aeração em um incubador shaker a 225 rpm por 12-16 horas a 37 graus Celsius.