0 visualizações • 3:45 min. • July 8th, 2025
A microscopia intravital de alta resolução, por meio de uma janela de imagem pancreática implantada, facilita a visualização em nível celular de área ampla e de longo prazo das ilhotas pancreáticas em um animal vivo.
Para o implante da janela de imagem pancreática, primeiro, posicione um camundongo anestesiado em uma posição lateral esquerda. Em seguida, fixe uma sonda para monitorar a temperatura do mouse e regule sua temperatura usando uma almofada de aquecimento. Agora, raspe o flanco esquerdo e esterilize a área.
Faça uma incisão cirúrgica e disseque os músculos abdominais. Insira suturas apropriadas na margem da incisão para fixar a moldura da janela de imagem na posição após o implante. Além disso, exponha e exteriorize o baço e identifique o pâncreas conectado.
Em seguida, sobreponha o pâncreas conectado ao baço na placa da janela de imagem pancreática personalizada, com o baço posicionado no espaço aberto da janela. Esse posicionamento do pâncreas o isola efetivamente dos movimentos intestinais vizinhos, reduzindo os artefatos induzidos pelo movimento durante a imagem. Aplique cuidadosamente cola de cianoacrilato na margem da janela de imagem, evitando os órgãos.
Monte uma lamínula sobre a margem da janela de imagem. Aperte as suturas ao redor da janela de imagem para prendê-la no lugar. O camundongo com a janela de imagem pancreática implantada está pronto para imagens pancreáticas intravitais.
Comece preparando a plataforma cirúrgica e desinfetando as superfícies com etanol a 70%. Após a anestesia, use uma sonda retal com uma almofada de aquecimento controlada homeotérmica para monitorar a temperatura corporal.
Remova o cabelo do flanco esquerdo do mouse e aplique álcool e iodo alternadamente, girando do local da incisão para a superfície externa, nunca voltando ao local da incisão e terminando com iodo. Em seguida, faça uma incisão de 1,5 centímetro no flanco esquerdo do camundongo, dissecando a pele e o músculo.
Use uma sutura preta ou de náilon 4-0 para realizar uma sutura em bolsa na margem da incisão. Acumule o baço cuidadosamente com uma pinça anelar e identifique o pâncreas. Colocando a janela no flanco do mouse, passe o baço e o pâncreas pelo espaço aberto da janela.
Em seguida, coloque suavemente o pâncreas na placa da janela de imagem enquanto coloca o baço no espaço aberto da janela. Use uma agulha de cateter de calibre 31 para aplicar gotas de cola de N-butil cianoacrilato na margem da janela de imagem, garantindo que uma quantidade mínima de cola seja aplicada.
Aplique suavemente uma lamínula redonda de 12 milímetros na margem da janela de imagem. Em seguida, segure o laço de sutura para encaixar na ranhura lateral da janela e amarre-o três vezes. Finalmente, para evitar a interrupção desses pontos apertados quando os ratos estiverem acordados, corte o local proximal máximo da gravata.