Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neuroscience
0 visualizações • 2:52 min. • August 7th, 2025
Coloque um mouse em uma câmara de indução selada conectada a uma entrada para fornecimento controlado de oxigênio.
Exponha-o a ciclos de baixos níveis flutuantes de oxigênio, chamados de pré-condicionamento hipóxico repetitivo, ou RHP.
A cada ciclo de oxigênio reduzido, os níveis de oxigênio no sangue do camundongo caem, criando um estado hipóxico.
Alguns neurônios do cérebro se adaptam gradualmente, ajustando seu metabolismo para sobreviver em um ambiente com baixo teor de oxigênio.
A barreira hematoencefálica, que protege o cérebro, permanece estável e previne a inflamação cerebral.
Remova o mouse da câmara e permita a recuperação. Em seguida, induza um acidente vascular cerebral isquêmico bloqueando a artéria cerebral média.
Isso impede que o sangue rico em oxigênio chegue ao cérebro, colocando os neurônios sob estresse extremo.
A barreira hematoencefálica é interrompida, desencadeando inflamação.
No entanto, os neurônios treinados em RHP são mais bem adaptados a condições de baixo oxigênio, tornando-os mais resistentes a danos e preservando sua função.
Isso sugere que o RHP ajuda os neurônios a se adaptarem e reduz os danos cerebrais causados por acidente vascular cerebral isquêmico e privação de oxigênio.
Para começar, divida os camundongos em dois grupos, o grupo RHP, que recebe exposições de 8% e 11% de oxigênio, e o grupo controle, que recebe exposições de 21% de oxigênio simultaneamente. Remova a tampa superior do filtro de cada gaiola e coloque a gaiola com garrafas de comida e água intactas nas câmaras conectadas aos seus respectivos tanques de oxigênio. Feche e prenda a tampa da câmara.
Abra a válvula de gás principal para os tanques e defina o fluxo inicial para cada câmara de indução para 2 litros por minuto, ou LPM. Após cinco minutos de exposição, reduza a taxa de fluxo para 1 LPM pelo restante da exposição. No final da exposição, reduza o fluxo para zero LPM e feche a válvula de gás para os tanques.
Abra as tampas da câmara e recoloque a tampa superior do filtro em cada gaiola. Coloque as gaiolas em alojamentos padrão até a próxima exposição hipóxica. Pulverize cada câmara de indução com um desinfetante e desodorizante após cada uso.
Exponha os camundongos RHP e controle na mesma hora do dia ao longo das duas semanas do protocolo. Em seguida, execute uma oclusão transitória da artéria cerebral média, ou um TMCAO, conforme descrito no texto.