Энциклопедия экспериментов JoVE
Neuroscience
0 просмотров • 1:24 мин. • August 7th, 2025
Возьмем биопечатные скелетные мышечные конструкции.
Эти конструкции содержат фибриновые гидрогелевые столбы со встроенными мышечными волокнами и микросферами.
Микросфера представляет собой пористую полимерную структуру, заключающую в себе нейротрофические факторы.
Возьмем ганглии дорсального корня, выделенные из эмбрионов цыплят.
Поместите по одному ганглию на каждую конструкцию и инкубируйте.
Нейротрофические факторы высвобождаются из микросфер в контролируемой физиологической концентрации, способствуя прорастанию проекций нейронов, называемых нейритами.
Добавьте фиксатор для фиксации конструкций.
Промойте с помощью буфера и добавьте блокирующий раствор, чтобы предотвратить связывание неспецифических антител.
Инкубируют с первичными антителами, которые специфически связываются с нейритом.
Промойте буфером, чтобы удалить несвязанные антитела.
Добавьте флуоресцентно помеченные вторичные антитела, которые связываются с первичными антителами.
Промойте буфером, чтобы удалить излишки антител.
Монтируйте конструкцию с помощью монтажного материала, содержащего ядерный краситель и покровное стекло.
Под конфокальным микроскопом визуализируйте рост нейритов.