Энциклопедия экспериментов JoVE
Microbiology
0 просмотров • 2:34 мин. • November 28th, 2025
Начните с срезов кишечника, окрашенных на гематоксилин и эозин, у крыс, испытывающих тепловой нагрузка: одну предварительно перорально обработали буфером как контроль, а другую — суспензия Bacillus subtilis .
Тепловой стресс повреждает белки тугих соединений кишечника, что приводит к укорочению ворсинок и истончению слизисты.
Предварительное лечение бактериями способствует высвобождению сигнальных молекул, которые стабилизируют белки плотного соединения, сохраняя высоту ворсинок и толщину слизисты.
Осмотрите срезы под высокоразрешающим световым микроскопом, чтобы выявить различия в высоте ворсинок.
Далее капли свежей крови каждой крысы на стеклянные слайды и накройте их покрытием.
Тепловой стресс дестабилизирует мембраны эритроцитов, высвобождая микровезикулы в кровоток.
Бактерии снижают системный окислительный стресс, стабилизируя мембраны эритроцитов и минимизируя везикуляцию.
Наблюдайте образцы крови под высококачественным световым микроскопом, чтобы оценить различия в везикуляции.
Сохранившаяся высота ворсинок в кишечном отделе и меньшее количество микровезикул в крови подтверждают защитное действие бактерий под тепловым стрессом.
После подготовки и окрашивания срезов тонкого кишечника согласно текстовому протоколу используйте микроскоп высокого разрешения, чтобы измерить кишечные ворсинки и общую толщину слизистой оболочки. Проанализируйте как минимум четыре образца каждой крысы и проведите не менее 20 измерений в каждом образце.
Для проведения высококачественной световой микроскопии образцов крови используйте платформу для вибрационной изоляции в качестве основы для микроскопической системы с видеокамерой и компьютером для записи живых изображений. После калибровки тестовых изображений согласно текстовому протоколу наместите по семь микролитров свежевзятой крови каждой крысы на стеклянный стекло и добавьте накладку. Затем сфотографируйте и запишите десять кадров размером 72 на 53,3 микрометра в каждом образце.
Наконец, используя программное обеспечение, предоставляющее высокоразрешённые оптические изображения с прямым видом в реальном времени, измеряйте концентрацию везикул.