JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Microbiology
0 görüntülenme • 2:28 dk. • October 30th, 2025
Floresan etiketli hareketli bakteriler ve etiketlenmemiş hareketsiz bakterilerden oluşan bir kokültür ile tohumlanmış bir cam lamel kabı ile başlayın.
Besin katkılı agaroz ped içeren tabağı alın ve çevresindeki silikon kalıbı dikkatlice çıkarın.
Çanağı eğin ve pedin kenarının altına kaydırmak için bükülmüş bir spatula kullanın. Ardından bir Petri plakasının kapağına yerleştirin.
Bakteri tabakasıyla eşit temas sağlamak için pedi alt tarafı aşağı bakacak şekilde bakteri hücrelerini içeren tabağa aktarın.
Hava kabarcıklarını gidermek için pede hafifçe bastırın.
Nemi korumak için önceden ıslatılmış mendilleri tabağın kenarına yerleştirin.
Ters çevrilmiş bir mikroskop altında, belirli bir süre boyunca bakteri davranışını izleyin.
Bakteriler büyüdükçe, hareketsiz bakteriler kimyasal cezbedici maddeler salgılar. Hareketli bakteriler bu sinyalleri algılar ve hareketsiz bakteri kolonilerine doğru hareket eder.
Zamanla, hareketli bakteriler birikir ve hareketsiz bakteri kolonilerini istila ederek bakteri etkileşimlerini doğrular.
Pedler kuruduktan sonra, önceden ısıtılmış steril 35 milimetrelik bir cam lamel kabının tabanına bir mikrolitre ko-kültürü eşit şekilde pipetleyin.
Steril cımbız kullanarak agaroz kalıbından silikon kesiği çıkarın, yana doğru eğin ve steril bir petri plaka kapağına bırakmak için agaroz pedin kenarının altına hafifçe bükülmüş bir spatula kaydırın.
90 derece açılı bir spatulayı pedin altına kaydırarak ve aşılanmış lamellerin üzerine yerleştirerek pedi bakteri hücrelerinin bulunduğu tabağa alt tarafı aşağı bakacak şekilde aktarın. Pedin lamel ile aynı hizada olmasını sağlamak için spatulayı kullanın ve hava kabarcıklarını yavaşça bastırın.
Nemli mendildeki fazla nemi alın ve pede temas etmediğinden emin olarak tabağın kenarına yerleştirin. Numune artık görüntüleme için hazırdır.