JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Microbiology
0 görüntülenme • 2:22 dk. • October 30th, 2025
Boynu traş edilmiş sırtüstü pozisyonda anestezi uygulanmış bir fare ile başlayın.
Tıraş edilen bölgeyi dezenfekte edin.
Boyunda bir kesi yapın, ardından akciğerler de dahil olmak üzere alt solunum yollarına giden hava yolu olan trakeayı ortaya çıkarmak için kası inceleyin.
İki küçük hava hacmi arasına yerleştirilmiş, akciğer patojeni bakterilerle önceden yüklenmiş bir şırınga alın.
İğneyi trakeaya sokun ve trakeayı temizlemek için ilk hava hacmini enjekte edin.
Daha sonra, bakteri aşılamasını ve ardından bakteri dağılımını alt solunum yollarının daha derinlerine arttırmak için ikinci hava hacmini verin.
Bakterilerin alt solunum yolu boyunca eşit dağılımını sağlamak için fareyi kısa bir süre dikey tutun.
Kesiği doku yapıştırıcısı ile kapatın ve farenin iyileşmesine izin verin.
Bu yöntem, patojenlerin üst solunum yolu bariyerlerini atlayarak doğrudan alt solunum yollarına verilmesini sağlar.
Fareyi uyuşturarak başlayın ve bir ayak parmağı tutamı kullanarak yeterince uyuşturulduğunu doğrulayın.
Ardından, fareyi sırtüstü konumlandırın ve boynun karın bölgesini tıraş edin. Açıkta kalan cildi dezenfekte edin. Şimdi, boynun üst ventral kısmının derisini sıçan dişi forseps ile kaldırın ve bir neşter kullanarak timusun üzerinde yarım ila bir santimetrelik bir kesi yapın.
Ardından, trakeayı ortaya çıkarmak için kası dikkatlice ayırın. Trakeaya yavaşça 50 mikrolitre hava, ardından 50 mikrolitre hazırlanmış NTHi ve ardından 50 mikrolitre hava daha enjekte edin.
Enjeksiyondan sonra hayvanı yaklaşık bir dakika dikey tutun. Ardından, kesiği doku yapıştırıcısı ile kapatın ve fareyi yaklaşık 10 dakika boyunca yanal olarak yaslanmış ve sıcak tutun.