Name: Farelerde Retinal Vasküler Perisitlerin İmmün Boyama ile 3D Görüntülenmesi (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-01T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 22 s
Description: Öğrenin, fare retinal vasküler perisitlerinin 3D görüntülenmesi için immün boyama ve doku temizleme yöntemlerini. Bu teknik, perisit morfolojisini ve damarlarla ilişkisini net şekilde ortaya koyar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<meta charset="utf8"></head><body>Doku temizleme ve floresan etiketleme kullanarak retinal perisitlerin görselleştirilmesi

<ol><li>Dreisig, K., Blixt, F. W., Warfvinge, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+cryo-sections%2C+whole-mounts%2C+and+hypotonic+isolated+vasculature+preparations+for+immunohistochemical+visualization+of+microvascular+pericytes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Retinal cryo-sections, whole-mounts, and hypotonic isolated vasculature preparations for immunohistochemical visualization of microvascular pericytes.</a> J Vis Exp. (140), e57733(2018).</li>
<li>Tual-Chalot, S., Allinson, K. R., Fruttiger, M., Arthur, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+mount+immunofluorescent+staining+of+the+neonatal+mouse+retina+to+investigate+angiogenesis+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Whole mount immunofluorescent staining of the neonatal mouse retina to investigate angiogenesis in vivo.</a> J Vis Exp. (77), e50546(2013).</li>
<li>Park, D. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plastic+roles+of+pericytes+in+the+blood-retinal+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Plastic roles of pericytes in the blood-retinal barrier.</a> Nat Commun. 8, 15296(2017).</li>
<li>Hughes, S., Chan-Ling, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+smooth+muscle+cell+and+pericyte+differentiation+in+the+rat+retina+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Characterization of smooth muscle cell and pericyte differentiation in the rat retina in vivo.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 45 (8), 2795-2806 (2004).</li>
<li>Puro, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinovascular+physiology+and+pathophysiology%3A+New+experimental+approach%2Fnew+insights%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Retinovascular physiology and pathophysiology: New experimental approach/new insights.</a> Prog Retin Eye Res. 31 (3), 258-270 (2012).</li>
<li>Hutter-Schmid, B., Humpel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet-derived+growth+factor+receptor-beta+is+differentially+regulated+in+primary+mouse+pericytes+and+brain+slices%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Neurovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Platelet-derived growth factor receptor-beta is differentially regulated in primary mouse pericytes and brain slices.</a> Curr Neurovasc Res. 13 (2), 127-134 (2016).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Demonstrating+hairy+and+glabrous+skin+innervation+in+a+3d+pattern+using+multiple+fluorescent+staining+and+tissue+clearing+approaches%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Demonstrating hairy and glabrous skin innervation in a 3d pattern using multiple fluorescent staining and tissue clearing approaches.</a> J Vis Exp. (183), e63807(2022).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+the+calcitonin+gene-related+peptide+immunoreactive+innervation+of+the+rat+cranial+dura+mater+with+immunofluorescence+and+neural+tracing%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Visualizing the calcitonin gene-related peptide immunoreactive innervation of the rat cranial dura mater with immunofluorescence and neural tracing.</a> J Vis Exp. (167), e61742(2021).</li>
<li>Batista, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Normative+mice+retinal+thickness%3A+16-month+longitudinal+characterization+of+wild-type+mice+and+changes+in+a+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Aging+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Normative mice retinal thickness: 16-month longitudinal characterization of wild-type mice and changes in a model of Alzheimer's disease.</a> Front Aging Neurosci. 15, 1161847(2023).</li>
<li>Huang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pericyte-endothelial+interactions+in+the+retinal+microvasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Pericyte-endothelial interactions in the retinal microvasculature.</a> Int J Mol Sci. 21 (19), 7413(2020).</li>
<li>Dong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exosome-mediated+delivery+of+an+anti-angiogenic+peptide+inhibits+pathological+retinal+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Exosome-mediated delivery of an anti-angiogenic peptide inhibits pathological retinal angiogenesis.</a> Theranostics. 11 (11), 5107-5126 (2021).</li>
<li>Li, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retro-orbital+injection+of+fitc-dextran+is+an+effective+and+economical+method+for+observing+mouse+retinal+vessels%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Vis%22%5BJournal%5D)">Retro-orbital injection of fitc-dextran is an effective and economical method for observing mouse retinal vessels.</a> Mol Vis. 17, 3566-3573 (2011).</li>
<li>Riew, T. R., Jin, X., Kim, S., Kim, H. L., Lee, M. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+dynamics+of+cells+expressing+ng2+and+platelet-derived+growth+factor+receptor-%CE%B2+in+the+fibrotic+scar+formation+after+3-nitropropionic+acid-induced+acute+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Tissue+Res%22%5BJournal%5D)">Temporal dynamics of cells expressing ng2 and platelet-derived growth factor receptor-β in the fibrotic scar formation after 3-nitropropionic acid-induced acute brain injury.</a> Cell Tissue Res. 385 (3), 539-555 (2021).</li>
<li>Susaki, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+cubic+protocols+for+whole-brain+and+whole-body+clearing+and+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Advanced cubic protocols for whole-brain and whole-body clearing and imaging.</a> Nat Protoc. 10 (11), 1709-1727 (2015).</li>
<li>Liang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cubic+protocol+visualizes+protein+expression+at+single+cell+resolution+in+whole+mount+skin+preparations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Cubic protocol visualizes protein expression at single cell resolution in whole mount skin preparations.</a> J Vis Exp. (114), e54401(2016).</li>
<li>Burns, S. A., Elsner, A. E., Gast, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+the+retinal+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Imaging the retinal vasculature.</a> Annu Rev Vis Sci. 7, 129-153 (2021).</li>
<li>Tomer, R., Ye, L., Hsueh, B., Deisseroth, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+clarity+for+rapid+and+high-resolution+imaging+of+intact+tissues%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Advanced clarity for rapid and high-resolution imaging of intact tissues.</a> Nat Protoc. 9 (7), 1682-1697 (2014).</li>
<li>Cai, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Panoptic+imaging+of+transparent+mice+reveals+whole-body+neuronal+projections+and+skull-meninges+connections%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Panoptic imaging of transparent mice reveals whole-body neuronal projections and skull-meninges connections.</a> Nat Neurosci. 22 (2), 317-327 (2019).</li>
<li>Richardson, D. S., Lichtman, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clarifying+tissue+clearing%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Clarifying tissue clearing.</a> Cell. 162 (2), 246-257 (2015).</li>
<li>Alarcon-Martinez, L., Yemisci, M., Dalkara, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pericyte+morphology+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Histol+Histopathol%22%5BJournal%5D)">Pericyte morphology and function.</a> Histol Histopathol. 36 (6), 633-643 (2021).</li>
<li>Dessalles, C. A., Babataheri, A., Barakat, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pericyte+mechanics+and+mechanobiology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Sci%22%5BJournal%5D)">Pericyte mechanics and mechanobiology.</a> J Cell Sci. 134 (6), jcs240226(2021).</li>
<li>Alarcon-Martinez, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurovascular+dysfunction+in+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Neurovascular dysfunction in glaucoma.</a> Prog Retin Eye Res. 97, 101217(2023).</li>
<li>Uemura, M. T., Maki, T., Ihara, M., Lee, V. M. Y., Trojanowski, J. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+microvascular+pericytes+in+vascular+cognitive+impairment+and+dementia%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Aging+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Brain microvascular pericytes in vascular cognitive impairment and dementia.</a> Front Aging Neurosci. 12, 80(2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>4 ',6-diamidino-2-fenilindol (DAPI)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>D3571</td><td>Işıktan koruyun</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 eşek anti-keçi IgG (H+L)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>A-11055</td><td>Işıktan koruyun</td></tr><tr><td>C57BL/6 fare</td><td>Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.</td><td>SCXK (Jing) 2021-0006</td><td></td></tr><tr><td>Konfokal görüntüleme sistemi</td><td>Olympus</td><td>FV1200</td><td></td></tr><tr><td>Keçi anti-PDGFR-&beta;</td><td>Araştırma ve Geliştirme</td><td>AF1042</td><td>25 & mikro; g&nbsp;</td></tr><tr><td>Imaris yazılımı</td><td>Oxford Instruments</td><td>v.9.0.1</td><td></td></tr><tr><td>Lycopersicon esculentum (Domates) lektin, DyLight594</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>L32471</td><td>1 mg</td></tr><tr><td>Mikrosantrifüj tüpü</td><td>Axygen</td><td>MCT-150-C</td><td>1.5 mL</td></tr><tr><td>Normal eşek serumu</td><td>Jackson ImmunoResearch</td><td>017-000-121</td><td>10 mL</td></tr><tr><td>Panoramik doku dilimi tarayıcı</td><td>Olympus</td><td>VS120-S6-W</td><td></td></tr><tr><td>Photoshop ve&nbsp; İllüstrasyon</td><td>Adobe</td><td>CS6</td><td></td></tr><tr><td>RapiClear 1.52 Solüsyon</td><td>SunJin Lab</td><td>RC152001</td><td>10 mL</td></tr><tr><td>Altı kuyulu plaka</td><td>Costar</td><td>3335</td><td></td></tr><tr><td>Yaylı makas&nbsp;</td><td>Güzel Bilim Araçları</td><td>15003-08</td><td></td></tr><tr><td>Superfrost Plus mikroskop slaytı</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4951PLUS-001</td><td>25 mm x 75 mm x 1 mm</td></tr></tbody></table>

farelerde retinal vasküler perisitlerin İmmün boyama ile 3d görüntülenmesi 

3D Visualization of Retinal Vascular Pericytes in Mice by Immunostaining

Tam montajlı retinanın dış görünümlerinden, doku temizleme tedavisi kullanılarak tüm montajlı retinanın doku şeffaflığı, doku temizleme yapılmayan retinanınkine kıyasla arttırıldı (Şekil 1).
Tüm mount retina üzerindeki histolojik inceleme için, retina vaskülatürü retro-orbital enjeksiyon yoluyla floresan domates lektini ile kırmızı ile işaretlendi ve retinal perisitler PDGFR-β ile yeşil renkte gösterildi (Şekil 2, Şekil 3 ve Şekil 4). Bu etiketleme, doku temizlemeden önce ve sonra numune üzerinde gözlemlenebilse de, bir karşılaştırma olarak, retina örneğinin arka plan gürültüsü doku temizleme tedavisi ile azaltılmıştır (Şekil 2). Tedavi ayrıca panoramik doku dilimi tarayıcısı (Şekil 2) ve lazer taramalı konfokal mikroskop (Şekil 3) altında işaretli retina perisitlerini ve damar sistemini daha net hale getirdi.
Retinal perisitlerin kademeli dağılımı burada retinal vasküler ağaç boyunca da gösterilmiştir (Şekil 3). Retinanın orta kısmından periferik bölgesine kadar, perisitler, vasküler gövde ve dallar ve kılcal damarlar dahil olmak üzere retina vaskülatürünün bazal membranında bulunur (Şekil 3).
Yukarıdaki gözleme dayanarak, perisitlerin ve retinal vaskülatür arasındaki uzamsal korelasyon, temizlenmiş retina örneğinden alınan daha yüksek büyütülmüş Z-yığını görüntüleri ile daha fazla değerlendirildi (Şekil 4). Görüntü işleme sisteminin yardımıyla, perisitlerin retina vaskülatürü etrafında farklı çaplarda sıkıca sarıldığını göstermek için 3D görünümler sağladık (Şekil 4). Şekil 4A0-D0 , retina damarlarının en yüksekten en düşüğe doğru hiyerarşik dallanmasını temsil eder. Perisitler kılcal damarlarda daha bol dağıldığından, Şekil 4D0'daki PDGFRβ boyaması, Şekil 4A0-C0'a kıyasla daha güçlü yoğunluk ve sinyal gösterir.
Doku temizleme tedavisi olmayan fare retinasının aksine (Şekil 1A, Şekil 2A, Şekil 3A0-D0), mevcut yaklaşım, tam montajlı retinadan perisitler ve kan damarları arasındaki uzamsal ilişkiyi göstermek için retinal arka plan sinyallerini etkili bir şekilde azaltmıştır (Şekil 1B, Şekil 2B, Şekil 3A1-D1).
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67436/67436fig01.jpg"> 
Şekil 1: Doku temizleme tedavisi olmadan ve tedavi ile tüm mount retinanın optik şeffaflığının karşılaştırılması. (A, B) Doku temizleme tedavisinden önce (A) ve (B) sonrası tüm retina dağının dış görünümleri. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67436/67436fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67436/67436fig02.jpg"> 
Şekil 2: Doku temizleme tedavisi olmadan ve tedavi ile tüm mount retinadan retina perisitlerinin ve vaskülatürünün etiketleme özelliklerinin karşılaştırılması. (A, B) (A) doku temizleme tedavisi öncesi ve sonrası (B) tüm retina dağının temsili montaj görüntüleri Sanal Slayt Sistemi altında çekildi. Damar sistemi kırmızı (floresan domates lektini), perisitler yeşil (PDGFR-β) ve hücresel çekirdek mavi (DAPI) renktedir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67436/67436fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67436/67436fig03.jpg"> 
Şekil 3: Doku temizleme tedavisi öncesi ve sonrası retina vasküler ağacı boyunca kademeli olarak retina perisitlerinin görüntüleme çözünürlüğünün karşılaştırılması. (A-D) Doku temizleme tedavisi öncesi (A0-D0) ve doku temizleme tedavisi sonrası (A1-D1) işaretli retinadan alınan temsili görüntüler, retina vaskülatürünü çevreleyen perisitlerin vasküler gövde sırasına göre dağılımını göstermektedir (A0, A1), birinci dereceden dallar (B0, B1), ikinci dereceden dallar (C0, C1) ve kılcal damar (D0, D1). Damar sistemi kırmızı (floresan domates lektini), perisitler yeşil (PDGFR-β) ve hücresel çekirdek mavi (DAPI) renktedir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67436/67436fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67436/67436fig04.jpg"> 
Şekil 4: Perisitlerin farklı çaplardaki retina vasküler sistemi ile mekansal korelasyonu. (M.S.) Retina vasküler ağacı boyunca etiketlenmiş retinadan, vasküler gövde (A0, A1), birinci dereceden dallar (B0, B1), ikinci dereceden dallar (C0, C1) ve kılcal damar (D0, D1) dahil olmak üzere retina vasküler sistemini çevreleyen perisitlerin dağılımını gösteren temsili yüksek çözünürlüklü görüntüler. A1-D1: A0-D0 panellerinin karşılık gelen görüntüleri, üç boyutlu görünümlerde farklı çaplarda perisitlerin retinal vaskülatür ile uzamsal korelasyonunu göstermek ve ayrıca A1-D1 panellerindeki (oklar) iç kısımlarla yerel bölgelerin büyütülmüş görünümlerini göstermek için yeniden yapılandırıldı. Damar sistemi kırmızı (floresan domates lektini), perisitler yeşil (PDGFR-β) ve hücresel çekirdek mavi (DAPI) renktedir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67436/67436fig04large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>

Farelerde Retinal Vasküler Perisitlerin İmmün Boyama ile 3D Görüntülenmesi 

Retinal pericytes are essential for vascular development and stability of the retina, playing a key role in maintaining the integrity of the retinal ...

3d-visualization-retinal-vascular-pericytes-mice

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Kaynak: Wang, Z.,  et al. Transpupiller İki Fotonlu Fare Retinasının İn Vivo Görüntülemesi.  J. Vis. Uzm. (2021). Bu video, iki foton mikroskobu kullanılarak in vivo retinal görüntüleme için bir tekniği göstermektedir. Anestezi uygulanmış fareler, başlarını sabitleyerek, göz kayganlaştırıcı uygulayarak ve gözün üzerine bir lamel yerleştirerek görüntülemeye hazırlanır. Floresan proteinleri eksprese eden retinal ganglion hücreleri (RGC'ler) ilk olarak hizalama için epifloresan kullanılarak...

Fare Retinasının İki Fotonlu İn Vivo Görüntülemesi

Yenidoğan fare retina bir anjiyogenez modüle farklı genler ya da uyuşturucu rolleri soruşturma izin anjiyogenez bir iyi karakterize fizyolojik modeli...

Anjiyogenez Araştırma Yenidoğan Fare Retina Tüm Dağı Immunofluorescent Boyama<em&gt; In vivo</em

İntravital mikroskopi, hayvanlarda retina vasküler çaplarını, kan dolaşım hızlarını ve toplam retinal kan akışını görselleştirmek ve ölçmek için kullanılabilir.

Farelerde Retinal Kan Akışının İntravital Video Mikroskobu Ölçümleri

Kemirgen retina uzun beyin için erişilebilir bir pencere olarak kabul edilmiştir. Bu teknik yazıda iskemik yaralanma sonrası, merkezi sinir sistemi içinde, vasküler rejenerasyon başarısız olmasına yol mekanizmaları incelemek için oksijen kaynaklı retinopatinin fare modeli kullanan bir protokol sağlar. Anlatılan sistem, aynı zamanda, retina ve CNS içindeki fonksiyonel kan damarlarının büyümesini teşvik etmek için stratejiler keşfetmek için dönüştüğü edilebilir.

Fare Retina kullanma CNS&#39;deki Vasküler Rejenerasyon Değerlendirilmesi

Biz üç farklı doku hazırlama teknikleri immunohistokimyasal görselleştirme sıçan retina mikrovasküler perisitlerden, Yani, soğutucu bölümü, Bütün bağlar ve damar ağının hipotonik yalıtım için göstermek.

Retina Cryo-kesitler, Bütün bağlar ve mikrovasküler perisitlerden immunohistokimyasal görselleştirme hipotonik izole damarlara hazırlıkları

İn vivo görüntüleme, sağlık ve hastalıkta biyoloji çalışmaları için güçlü bir araçtır. Bu protokol, standart iki foton mikroskobu ile fare retinasının transpupiller görüntülemesini tanımlar. Ayrıca, retinanın birden fazla hücresel kohortunu floresan olarak etiketlemek için farklı in vivoimaging yöntemleri göstermektedir.

Transpupiller İki Foton Fare Retinasının In vivo Görüntülenmesi

Bu protokol, farelerin retinal düz montajlarının hazırlanması ve immünofloresan boyanması ve analizi için ayrıntılı bir yöntemi açıklamaktadır. Floresein fundus anjiyografinin (FFA) fare yavruları ve görüntü işleme için kullanımı da ayrıntılı olarak açıklanmaktadır.

Oksijene Bağlı Retinopati Fare Modelinde Retina Damarlarının Dinamik Büyümesinin İzlenmesi

Bu makalede, tüm mount retinal preparatları için iyi kurulmuş ve tekrarlanabilir bir lektin lekesi testi ve proliferatif ve proliferatif olmayan retinopatilerde sıklıkla değiştirilen vasküler parametrelerin nicel ölçümü için gerekli protokoller açıklanmaktadır.

Proliferatif Olmayan ve Proliferatif Retinopatilerle Farelerin Tüm Mount Retinalarında Vasküler Parametrelerin Nicelemesi

Fare retinal damar sistemi, vasküler patern oluşumunun mekanizmalarını anlamada özellikle ilgi çekicidir. Bu protokol, optik diskten sabit bir mesafede floresan anjiyografi fundus görüntülerinden fare retina damarlarının çapını otomatik olarak ölçer.

Fare Floresan Anjiyografi Görüntülerinden Retina Damar Çapının Ölçülmesi

Retina damar sisteminin oksidatif stres ve sitokinler gibi diyabet/diyabetik retinopati ile ilişkili hakaretlerden ölüme karşı direncini izlemek için bir koruma testi geliştirilmiştir.

Farelerde Retina Damar Sisteminin Diyabete Bağlı Ölümden Korunmasını Saptamak İçin Bir Test

Bu el yazması, fare gözlerinden retinal glial Müller hücrelerini izole etmek için ayrıntılı bir protokolü açıklamaktadır. Protokol, fare gözlerinin enükleasyonu ve diseksiyonu ile başlar, ardından Müller hücrelerinin izolasyonu, tohumlanması ve kültürlenmesi ile devam eder.

Primer Fare Retinal Glial Müller Hücrelerinin İzolasyonu

Öğrenin, fare retinal vasküler perisitlerinin 3D görüntülenmesi için immün boyama ve doku temizleme yöntemlerini. Bu teknik, perisit morfolojisini ve damarlarla ilişkisini net şekilde ortaya koyar.

Farelerde Retinal Vasküler Perisitlerin İmmün Boyama ile 3D Görüntülenmesi

Daha fazla video keşfet